脂质纳米颗粒包封效率

在纳米颗粒表征领域，采用荧光包封效率 (EE%) 测定法来检测纳米颗粒内外的 RNA 负载量，堪称一项繁琐至极的工作。传统的基于荧光染料的测定方法操作步骤繁杂，一次仅能检测少量样品，优化难度大，重复性欠佳，而且还需使用有毒的去污剂，让人颇为头疼。

其他方法通常需要为每个脂质纳米颗粒 (LNP) 样品制备两份样品，以测定包封率 (EE%)。首先，测量完整样品中游离 RNA 的含量。由于荧光染料无法进入纳米颗粒内部，初始读数便是利用荧光染料来测定溶液中游离的 RNA。之后，添加去污剂破坏纳米颗粒，再次测量 RNA 浓度，以此得到总 RNA 浓度。

在该测定中，一个 96 孔板最多能处理 12 个样品，每个样品做两次重复。孔板的其余孔位则用于空白对照以及每个样品 (含或不含表面活性剂) 的多条校准曲线。每块板需要进行超过 266 次单独的移液操作，即便是经验丰富的技术人员，仅完成 LNP 表征中 EE% 检测这一部分工作，就需要 1 个多小时。