腺相关病毒载体的浓缩与缓冲液置换

面临的挑战

在科学界,人们通常需要对制备的较低滴度的腺相关病毒进行纯化和浓缩。但使用离心过滤装置或流动过滤设备进行相关操作,通常需要耗费大量的人力——特别是在样品数量较多和样品体积较大的情况下。此外,腺相关病毒载体,腺相关病毒载体需要进行快速地纯化及缓冲液置换,该过程不能损坏腺相关病毒载体的完整性,并且还要具有高回收率。

解决方案

Lil’ Tuna是一款全自动、基于孔板的台式缓冲液置换系统,适用于各种规模的蛋白质、核酸和基因治疗载体样品。Lil’ Tuna可对96孔板和24孔板中的样品进行浓缩或缓冲液置换,以实现更高通量;也可并行处理至多6个独立样品,且这些功能均可在同一台仪器上完成。其基于压力驱动的超滤/渗滤 (UF/DF) 方法可确保处理过程高效进行,并在整个运行过程中监测样品体积、准确补加缓冲液,从开始到结束自动完成缓冲液置换循环的每一个步骤。

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Lil’ Tuna可根据不同的通量需求使用多种耗材。对于较高通量的应用,可使用名为Unfilter的孔板式耗材。所有 Unfilters均采用再生纤维素膜,能够减少非特异性结合,因此特别适用于病毒载体样品。Unfilters提供两种规格:96孔板,适用样品体积为100–450 µL;24孔板,适用样品体积为0.45–8 mL。对于单个样品,可使用名为Una的独立样品孔。每个Una可容纳0.45–8 mL样品,Lil’ Tuna每次运行可处理1–6个Una。Una可配备再生纤维素膜或聚醚砜膜,用户可根据样品特性选择更合适的膜材。Unfilter和Una的设计均旨在确保样品保持在原位、尽量避免被膜吸附,同时使液体顺利通过,样品回收率可达≥96%。因此,无论样品量大小或可用体积多少,Lil’ Tuna都能提供合适的耗材形式。

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实验论证

评估腺相关病毒载体的衣壳稳定性

腺相关病毒载体的衣壳稳定性会受到缓冲液pH、盐和离子强度的变化的影响。如果将Lil’ TunaAunty一起搭配使用,那么您就可以在不使用大量样品的情况下对这些影响因素进行研究。Lil’ Tuna可以在不破坏衣壳的情况下,对腺相关病毒载体进行温和的换液,然后Aunty就可以用来评估在这些不同的影响因素下,腺相关病毒载体的衣壳稳定性以及核酸开始释放的温度。

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Lil' Tuna

Lil’ Tuna是一款自动化、基于孔板的超滤/渗滤 (UF/DF) 系统,可用于蛋白质、病毒载体和核酸样品的缓冲液置换、浓缩或脱盐,并始终保持较高的样品回收率。该系统可并行处理1–96个样品,尽可能减少人工操作时间,并为配方筛选、稳定性测试或其他下游分析提供一致、可靠的样品制备结果。

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