腺相关病毒载体的衣壳稳定性
面临的挑战
保持腺相关病毒 (AAV) 载体的衣壳稳定对于基因载荷的递送有着至关重要的作用，因为衣壳蛋白在制造或储存过程中会裂解或聚集。即使是在给药之后，衣壳的稳定性仍然关系着腺相关病毒载体能否准确释放其载荷。
检测腺相关病毒 (AAV) 载体的衣壳稳定性并不是一件容易的事情，因为它通常需要使用到许多仪器和复杂的技术，而这些仪器和技术要么不仅需要较长的检测时间，还需要大量的样品。功能性检测实验 (如转染及感染性测定) 不仅需要花费数天时间进行测量，而且还需要使用到专业人才；而电子显微镜检测通量太低，而且检测成本又高。即便是常规的测定 (比如：腺相关病毒载体酶联免疫吸附试验——可用于检测完整衣壳的滴度，或者定量聚合酶链反应测定技术——可用于基因组的定量) 也需要花费几个小时的时间，而且通常需要对实验进行复杂的设计。
解决方案
作为一款全能型分析仪器，Uncle可以通过简单、快速、低样品量的分析来测定腺相关病毒载体的稳定性。Uncle通过在升温过程中，将获取得到的全光谱荧光和静态光散射 (SLS) 相结合，实现在一次实验中即可对衣壳、蛋白和DNA进行检测，以获得稳定性的相关数据。只需9 μL的样品，Uncle就可以在2小时内得到测定结果，让您可以更快地对众多的候选样品、不同的配方或条件进行筛选，进而得到理想的样品。
实验论证
您身边的优选分析工具
将腺相关病毒载体和SYBR Gold®染料放在Uncle上进行差示扫描荧光 (DSF) 实验，当腺相关病毒载体的衣壳开始释放出基因组时，您就可以获得该温度值了。这个温度我们称之为基因组释放温度，它通常发生在衣壳蛋白的裂解和聚集之前。当游离DNA的数量增加时 (无论这些DNA是在实验开始前因为腺相关病毒载体的降解而产生，还是在热稳定性测定期间从腺相关病毒载体的衣壳中释放出来的)，SYBR Gold的荧光强度会增大；当静态光散射 (SLS) 的强度急剧增大时，您就可以很轻松地找到聚集开始发生时的温度。
- 衣壳稳定性受到很多因素的影响，比如：
- 血清型或者重组衣壳序列
- 包封的基因组长度
- 基因组的单双链结构
- 配方
- 衣壳的化学稳定性 (如脱酰胺反应)
Uncle可以有效地评估以上因素对腺相关病毒载体的衣壳稳定性的影响，并还能通过检测基因组释放、衣壳蛋白的变性和聚集，深入了解它们如何影响衣壳稳定性。
配方优化
理想的配方，可以让您的腺相关病毒载体衣壳尽可能长时间的保护其基因组。配方中有很多因素 (比如赋形剂和pH值) 都会影响腺相关病毒 (AAV) 载体衣壳的稳定性。
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