外泌体和细胞外囊泡的表征
面临的挑战
对大多数分析工具来说，外泌体和细胞外囊泡 (EVs) 的表征并不是一件容易的事情，因为它们的体积小、蛋白含量低，并且习惯与脂蛋白共同纯化。生物样品中的囊泡浓度通常较低，因此在开始分析之前，必须对原始样品进行纯化和浓缩。
在复杂的样品面前，像纳米颗粒跟踪分析 (NTA) 和可调电阻脉冲传感技术 (TRPS) 效果不佳。它们通过非特异性方法捕捉到所有存在的非囊泡颗粒，进而影响了结果的特异性和灵敏度。基于抗体的技术方法包括荧光纳米颗粒跟踪分析 (fNTA) 和纳米流式检测虽然可以增强外泌体的特异性，但也有一些局限性，比如fNTA通过荧光标记极大地增强了特异性，但却面临着严重的光漂白问题，增强了亚群分析的难度。与所有其他技术一样，纳米流式检测技术需要对样品进行纯化和浓缩，并且难以确定60 nm以下的外泌体的粒径。
解决方案
Leprechaun通过结合荧光成像技术和单粒子干涉测量技术，可以提供有关任何类型的外泌体样品的完整表征，且无需对样品进行纯化。只需使用到Leprechaun的Luni耗材，即可对细胞外囊泡 (EVs) 进行测定。通过抗体微阵列技术，Luni可以使用四跨膜蛋白抗体从溶液中特异性地捕获外泌体，然后荧光抗体会确认所捕获的外泌体，进而防止测定结果受到其他颗粒和脂蛋白的影响。每个样品只需使用到25 µL，Leprechaun即可通过对单个囊泡的灵敏度，检测出外泌体的浓度、粒径和表型。
实验论证
低浓度测量
Leprechaun可以测定出浓度低至5x105 颗粒/毫升的外泌体，所以您无需担心在测量复杂的样品时，无法检测出相对稀少的细胞外囊泡。Leprechaun结合了来自三个荧光通道的数据，构建每个外泌体上存在的蛋白质的图像。加入您自己的荧光抗体，对特定的外泌体进行分析，从而得到您自定义表达的EVs浓度。
测定较小的细胞外囊泡
Leprechaun通过单粒子干涉测量 (SP-IRIS) 技术，可以清晰地检测出小至35 nm的外泌体的高分辨率的粒径分布，开启了其它平台无法触及的小型EVs的世界。您可以通过单独测量每个细胞外囊泡，将粒径数据与荧光抗体染色的表型信息相结合，勾画出一张细胞外囊泡亚群的粒径信息图。
Flex您的细胞外囊泡
如果您正在研究一个非常稀有的外泌体种群，那么您可以使用Flex Lunis创建自定义分析。在使用Leprechaun时，您完全可以自定义您的标记物，无需使用常用的四跨膜蛋白抗体，即可富集您所标记的稀有细胞外囊泡的数量。
Leprechaun
无论样品的纯度如何，Leprechaun都可以准确地测定出病毒和外泌体的滴度和结构。Leprechaun可以连续三次检查慢病毒颗粒，确保慢病毒的大小和结构都符合您的需求，并确保慢病毒含有RNA。让Leprechaun为您揭示所有类型 (包括细胞培养上清液和生物流体) 的外泌体的浓度和表型信息吧！
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