慢病毒污染物分析
面临的挑战
从生物反应器中新鲜得到的慢病毒粗制液中通常会含有来自生产细胞的污染物，比如，游离蛋白和自由漂浮的核酸和非病毒性囊泡都会“隐藏”在珍贵的慢病毒身边。研究显示，非病毒性细胞外囊泡 (EV) 可以将核酸和蛋白质递送给靶细胞，很有可能会对慢病毒转染产生功能性干扰。因此，要想获得高质量治疗性载体，研究人员需要在纯化工作中排除这些影响因素并提高慢病毒的滴度。
但要在纯化过程中进行有效的慢病毒污染物分析并不是一件容易的事情，目前市面上的大多数分析方法都无法准确地分析慢病毒的污染物，比如p24酶联免疫吸附试验法 (ELISA) 不能区分病毒内部p24衣壳蛋白和游离p24衣壳蛋白。此外，如果您想要在研究过程中分辨出慢病毒和周围的细胞外囊泡，粒径分析仪器和酶联免疫吸附试验法都无法帮到您。
解决方案
Leprechaun不仅能找到非病毒性细胞外囊泡污染颗粒，还能分辨出病毒内部p24衣壳蛋白和游离p24衣壳蛋白。无论是哪一种假型性慢病毒，只需25 µL样品，Leprechaun就能一次得知慢病毒滴度、聚集状态和污染物浓度。整合这些信息后，您就可以确切地知道您的慢病毒样品批次中含有什么物质了，如果您打算用您的慢病毒来开发嵌合抗原受体T细胞免疫疗法 (CAR-T) 或其他细胞疗法，那么了解这些信息是必不可少的。
Leprechaun的EV Contaminant Kit配有Luni耗材，Luni可以捕获和检测污染物和慢病毒。在Luni表面添加p24衣壳蛋白和四跨膜蛋白的捕获抗体之后，游离p24衣壳蛋白以及表面携带四跨膜蛋白的非病毒性细胞外囊泡就能结合在Luni上。
实验论证
分析与确定
Leprechaun在进行分析时，由于慢病毒颗粒会保持完整，所以只有那些没有包裹在病毒中的p24衣壳蛋白 (游离p24衣壳蛋白) 才能与p24衣壳蛋白的抗体位点相结合，进而被测定。同时，Leprechaun会通过干涉测量法测量四次跨膜蛋白捕获点上的颗粒的大小，并对这些颗粒的表面蛋白进行免疫染色，以确定颗粒是否为慢病毒。
纯化
Leprechaun可以帮助您准确地测定出慢病毒的滴度及其污染物，获得慢病毒纯化所需的所有信息，让您的慢病毒纯度达到尽可能大的值，确保您的慢病毒能够投入到最终的嵌合抗原受体T细胞生产中。
Leprechaun
无论样品的纯度如何，Leprechaun都可以准确地检测出病毒和外泌体的滴度和结构。Leprechaun通过三个维度的鉴定，确保慢病毒的大小和结构符合您的需求，并含有RNA。快来与Leprechaun一起揭开外泌体和病毒表型的奥秘吧！
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