紫外/可见吸收光谱

蛋白质、DNA或RNA样品的吸光度与浓度成正比。蛋白质在280 nm处吸收的光最多，而DNA和RNA在260 nm处达到峰值。根据比尔定律，已知280 nm或260 nm（称为A280或A260）处的吸光度、已知光通过溶液的光程长度和样品的消光系数或浓度因子，就可以计算出样品的浓度。紫外/可见分光光度计能够自动进行这些测量和计算，无需任何额外的试剂。优秀的分光光度计可以在低样品体积下进行高通量的测量。

Lunatic和Stunner分光光度计使用了固定光程的微量比色皿 (图2)，仅需2 μL样品就可以在230-750 nm和0.03-275 的吸光度范围内进行高速的紫外/可见吸收光谱分析。微量比色皿是微流控环路的一部分，可以防止样品间的交叉污染或蒸发的发生，同时提供高精度的吸收光谱数据。固定的光程长度，能使Lunatic和Stunner的准确度达到2%以内，精确度在1%以内。有关紫外/可见吸收光谱和Lunatic创新技术的更多信息，请查看此技术说明。

Lunatic和Stunner的检测板是符合SBS标准的96孔平板。平板上每个样品孔都对应有两个微量比色皿，光程分别为0.1mm和0.7mm。0.1 mm的微量比色皿可以检测到较高的吸光度，而0.7mm的微量比色皿可以检测到较低的吸光度。因此，这两种不同尺寸的微量比色皿可以让您无需稀释，即可同时检测不同浓度的样品。且在10分钟内即可完成96个样品的检测。Lunatic和Stunner的质量评估已经通过了美国国家标准与技术研究院 (National Institute of Standards and Technology, NIST) 的参考材料 (Reference Materials, RMs) 的验证。美国国家标准与技术研究院有3种用于测试紫外/可见分光光度计的参考材料：单克隆抗体 (NISTmAb)、色氨酸和尿嘧啶，Lunatic和Stunner对这些材料的测量结果都达到了原标定浓度值。在检测这些样品时，Lunatic和Stunner都可以保证每次的测量值都与标准值的偏离程度不超过2% (图3)，符合美国药典 (United States Pharmacopoeia, USP) 和欧洲药典 (European Pharmacopoeia, Ph. Eur.) 的指导原则。

紫外/可见吸收光谱法是众所周知的直接定量蛋白质、DNA和RNA的方法之一。Unchained Labs通过新型的光学技术、优质的耗材和分析技术，将紫外/可见吸收光谱定量分析推到了一个新的高度。