腺相关病毒载体的滴度及其空/实心率
面临的挑战
快速有效地测定腺相关病毒 (AAV) 载体的滴度及其空/实心率是研发和生产过程中的一个重要挑战，因为在这个过程中研究人员通常需要快速得到数据结果，并根据腺相关病毒载体的滴度及其空/实心率做出进一步的决定，同时还要尽可能保证较低的样品消耗量。
基于分析超速离心法 (AUC)、透射电子显微镜法 (TEM)、高效液相色谱法 (HPLC)、酶联免疫吸附测定法 (ELISA) 以及聚合酶链式反应 (PCR) 等的检测法都可以提供样品的一些信息，但它们都无法同时满足用量低、耗时短、容易操作这些需求并提供完整的结果。尽管分析超速离心法通常被称为金标准检测法，但它仍需要花费大量的时间、样品和专用设备。虽然酶联免疫吸附测定法和聚合酶链式反应法也是比较实用的方法，但它们需要花费数小时进行检测，并且还需要对每个腺相关病毒载体进行方法开发和优化。
实验论证
Stunner通过结合紫外/可见光谱与静态光散射和动态光散射，来检测腺相关病毒载体的总滴度、完整衣壳滴度和空/实心率。Stunner可以通过动态光散射检测样品中颗粒的粒径大小和分布。由动态光散射得到的粒径光强分布可以让我们只聚焦于由腺相关病毒载体衣壳产生的散射光。静态光散射的光强与颗粒浓度成正比，但由于实心衣壳和空衣壳散射的光量不同，要准确确定腺相关病毒载体的滴度，还需要使用到紫外/可见光谱所获得的数据。
紫外/可见光谱可以测定样品中的蛋白质和DNA的总量，然后我们就通过蛋白质和DNA的比例来深入了解纯化过的腺相关病毒载体的空/实心率。当Stunner将紫外/可见光谱的数据与动态光散射和静态光散射的数据相结合起来时，我们就可以有足够的信息来对衣壳的散射光进行分析，并知道有多少衣壳可能是实心的。所以，Stunner可以检测出腺相关病毒载体的总滴度、实心衣壳滴度和腺相关病毒载体的空/实心率。如果Stunner通过紫外/可见光谱检测到样品中有额外的DNA或蛋白质，那么我们将这些DNA或蛋白质定义为游离的/聚集的DNA或蛋白质。
Stunner
只需2 μL样品，Stunner就能将紫外/可见光谱的数据与动态光散射 (DLS) 和静态光散射 (SLS) 的数据整合在一起，获取样品的各种信息。Stunner不仅可以检测腺相关病毒载体的总衣壳滴度及其控/实心率，还能检测任何纳米颗粒，获取该颗粒的粒径及其内容物的浓度信息。通过结合浓度、流体力学粒径、多分散性和聚集状态的数据，Stunner可以一下子就帮我们确定腺相关病毒载体、纳米颗粒和蛋白质的品质。
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